給予動物鼠籠傾斜、潮濕墊料、高溫、噪音、束縛、電擊、游泳、晝夜節(jié)律顛倒等不同刺激因子，且刺激因子安排為多變性和不可預(yù)測，可誘導(dǎo)性是模型制造成功的關(guān)鍵。該模型被廣泛用于抑郁癥神經(jīng)生物學(xué)機制及抗抑郁藥物的研究，以及伴發(fā)的焦慮、學(xué)習(xí)記憶障礙及防護藥物研究。

本研究中，通過水迷宮實驗、避暗實驗結(jié)果可以看CUMS模型組水迷宮尋臺潛伏期顯著性延長，避暗錯誤次數(shù)顯著性增加、避暗潛伏期顯著性減少等，這些行為學(xué)結(jié)果，提示大小鼠CUMS模型成功。此外本實驗還對CUMS模型的機制進(jìn)行了基礎(chǔ)研究，認(rèn)為CUMS模型會導(dǎo)致動物皮層的5-HT、DA、Ach、NE等神經(jīng)遞質(zhì)水平顯著性降低（P<0.05）。因此我們認(rèn)為采用慢性不可預(yù)測應(yīng)激，35天可以造成大鼠和小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙。

模型技術(shù)難點在于對于CUMS刺激因子的選擇，刺激因子的選擇可能影響實驗?zāi)Ｐ偷某晒εc否，常用的刺激因子有禁食(12 h)、禁水(12 h)、冷水游泳(4 °C，5 min)、熱水游泳(42 °C，5 min)、動物叫聲(0.5 h)、束縛(使用自行研發(fā)的小鼠行為限制器，長20 cm，直徑7 cm)、晝夜顛倒、配對飼養(yǎng)、濕籠、傾籠等。每日選擇2~3 種刺激，并盡量使應(yīng)激程序符合不可預(yù)測的特點，以避免動物產(chǎn)生適應(yīng)性。相同的刺激因子應(yīng)該隔3-7日再進(jìn)行。

本研究通過不同的刺激因子對老鼠造成慢性不可預(yù)測應(yīng)激模型，通過水迷宮、避暗等經(jīng)典行為學(xué)指標(biāo)，以及5-HT、DA、Ach、NE等神經(jīng)遞質(zhì)基礎(chǔ)機制指標(biāo)，表明了慢性不可預(yù)測應(yīng)激誘導(dǎo)老鼠學(xué)習(xí)記憶損傷模型的成功，并且該模型對于大小鼠具有相同的效果，本模型可用于進(jìn)一步的改善學(xué)習(xí)記憶藥物的藥效學(xué)評價。

本實驗采用健康成年SPF級老鼠。飼料墊料均為高壓滅菌產(chǎn)品，購自北京維通利華實驗動物有限公司，動物用水均經(jīng)過除菌處理。實驗動物以完整的包裝直接進(jìn)入實驗室，觀察適應(yīng)5天后無異常情況，方進(jìn)行實驗。實驗過程中動物操作均符合動物倫理學(xué)規(guī)范，對環(huán)境和生態(tài)影響等符合國家相關(guān)法律規(guī)定。

1. 尾吊對攝食飲水的影響

如表1 所示，在實驗開始前各組之間攝食飲水量均無統(tǒng)計學(xué)差異。造模3 周后各組大鼠攝食飲水量也無統(tǒng)計學(xué)差異。

2. 尾吊對體重的影響

如表2 所示，大鼠體重在實驗前無統(tǒng)計學(xué)差異，體重變化率在實驗后1 周出現(xiàn)顯著性變化( P ＜0. 05) ，假尾吊組和尾吊組大鼠體重顯著低于對照組( P ＜ 0. 05) ，這種差異持續(xù)到第3 周，且有逐步增大的趨勢。假尾吊組和尾吊組之間大鼠體重?zé)o統(tǒng)計學(xué)差異。

3. 不同時間段尾吊大鼠運動狀態(tài)的變化

由圖3 所示，在各個時段對照組大鼠運動時間都少于假尾吊組和尾吊組; 假尾吊組和尾吊組大鼠運動時間無顯著性差異，但在造模1 ～ 10 d 假尾吊運動狀態(tài)不穩(wěn)定，個體差異也很大，10 d 之后運動狀態(tài)趨于穩(wěn)定。

1、實驗耗材

傷濕止痛膏、醫(yī)用橡皮膏

2、實驗儀器和環(huán)境

模擬失重尾部懸吊實時監(jiān)測的裝置.

圖1 尾吊裝置圖及軟件界面圖

（中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所、中國航天員中心聯(lián)合研制）

3. 實驗方法

3.1 造模方法

動物適應(yīng)3-7后開始造模，將動物尾巴距尾根部約1cm處纏上傷濕止痛膏與醫(yī)用橡皮膏，通過金屬鏈條將其與尾吊儀相連。具體操作如下：將傷濕止痛膏剪成大鼠約長7cm，寬約1cm（小鼠長5cm,寬約0.5cm）的長條狀，將其中間段1/3長度延長軸對疊，兩頭端1/3處粘在大鼠距尾根部約1cm處，使其成一個環(huán)形結(jié)構(gòu)，將醫(yī)用橡皮膏螺旋形包裹在其外部，避免滑脫。將一頭帶鉤的金屬鏈條鉤住環(huán)狀膏藥，另一頭連接尾吊儀微動開關(guān)的環(huán)形掛圈，根據(jù)需要調(diào)節(jié)鏈條長度，并用金屬夾將鏈條固定。尾吊模型動物尾部懸吊，前肢著地，后肢離地，身體與水平面成30-60°。

圖2 大鼠尾吊圖

3.2、檢測方法

根據(jù)模擬失重尾部懸吊實時監(jiān)測裝置使用規(guī)范調(diào)節(jié)儀器，開始檢測，大鼠自由飲食飲水，全天24小時不間斷造模、檢測，造模時間依據(jù)實驗?zāi)康亩ǎǔ?4天。14天后進(jìn)行行為學(xué)檢測，行為學(xué)檢測期間應(yīng)保持大鼠處于造模的尾平/尾吊狀態(tài)，在行為學(xué)檢測時應(yīng)盡量減少動物的非尾吊時間，取下后及時檢測，檢測完后及時尾吊。具體實驗測試方法、檢測模式和評價標(biāo)準(zhǔn)見實驗方法。

4. 注意事項

4.1.尾吊會造成尾部的血液不循環(huán)，纏膏藥時若使用力度不合適，易導(dǎo)致尾巴逐漸紅腫、疼痛。尾吊時在纏尾部的膏藥時注意掌握力度，適時調(diào)整。

4.2.尾吊動物多偏狂躁，取掛時應(yīng)異常小心，取掛時候可以一只手握住動物身體，防止其轉(zhuǎn)頭，另一只手將其從尾吊掛鉤上取下。

4.3.尾吊期間要保持尾吊環(huán)境的干凈整潔、室內(nèi)溫濕度的適宜，以及室內(nèi)的安靜，以保證結(jié)果的真實可靠。

5.1 行為學(xué)檢測

動物按相應(yīng)分組在模擬失重尾部懸吊實時監(jiān)測裝置中造模3 周，造模期間每天8: 00pm 提取當(dāng)天被監(jiān)控動物( 8: 00am ～ 12: 00am) 、( 2: 00pm ～ 6:00pm) 、( 8: 00am ～ 8: 00pm) 、( 8: 00pm ～ 8: 00am) 、24 h 等5 個時段自主活動數(shù)據(jù)。同時，每周檢測動物攝食飲水量和體重變化。攝食飲水量測定: 造模前一天和造模第7、14、21 天分別測定一次。測量當(dāng)天上午8: 00 每只動物給予200 g 飼料，200 mL 水，第二天同一時刻收集剩余飼料和飲水，攝食飲水量以食物飲水消耗絕對值來評定。體重變化測定: 在造模前一天和造模第7、14、21 天分別稱量體重并計算體重變化率，體重變化率= ( 第N 周體重－ 實驗前1 天體重) /實驗前1 d 體重。?

2016年我國天宮二號空間實驗室和神舟十一號飛船成功發(fā)射、對接、分離成功和神舟十一號飛船的順利返回，標(biāo)志著中國的載人航天戰(zhàn)略步伐已從短期飛行邁入中長期在軌駐留階段。人類50多年的航天飛行經(jīng)驗表明，中長期航天飛行過程中，航天員處于持續(xù)失重暴露下的高負(fù)荷頻繁的出艙作業(yè)、交流受阻的狹小活動空間，導(dǎo)致心血管功能障礙、失重骨丟失和肌肉萎縮的同時，誘發(fā)出焦慮、抑郁，認(rèn)知功能降低，甚至造成重大操作失誤。NASA（NationAmerica Space Agency美國航天局）在針對21世紀(jì)航天發(fā)展路線圖作出的風(fēng)險評估報告中指出，未來國際空間站、月球飛行和火星飛行任務(wù)中，航天員對復(fù)雜操作作業(yè)能力的下降，是直接影響航天員健康和工作任務(wù)完成的主要原因。俄羅斯的航天飛行實踐表明航天員在飛行的頭半個月，出現(xiàn)記憶能力減退、近期記憶受損等現(xiàn)象。NASA于1998年就啟動了神經(jīng)實驗室計劃（NeurolabMission），希望通過對失重條件下神經(jīng)系統(tǒng)變化的研究尋找到有效的增強航天員認(rèn)知能力的措施。

由于航天飛行耗費巨大，目前國際科學(xué)界是在地面模擬失重環(huán)境，開展航天失重科學(xué)研究。除人體頭低位模擬外，大鼠/小鼠尾部懸吊（6-10），因其穩(wěn)定、易于復(fù)制而作為國際上公認(rèn)的模擬失重動物模型在航天醫(yī)學(xué)界得到廣泛應(yīng)用。