
采用OVA、LPS和煙熏共刺激方法建立的ACO小鼠模型可較好模擬ACO的臨床病理特征。
本實(shí)驗(yàn)采用昆明種6-8周齡的健康成年小鼠,體重均在33±2g,SPF級(jí)。飼料墊料均為高壓滅菌產(chǎn)品,購自北京斯貝福生物科技股份有限公司,動(dòng)物用水為實(shí)驗(yàn)室制UP水經(jīng)過除菌處理。飼養(yǎng)及實(shí)驗(yàn)操作均于具有檢驗(yàn)合格資質(zhì)的SPF級(jí)屏障動(dòng)物室內(nèi)進(jìn)行,并且實(shí)驗(yàn)動(dòng)物以完整的包裝直接進(jìn)入屏障實(shí)驗(yàn)室,觀察室適應(yīng)7天后無異常情況,方可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。所有實(shí)驗(yàn)中小鼠均引頸處死,盡量減少動(dòng)物手術(shù)創(chuàng)傷程度及失血量。實(shí)驗(yàn)過程中動(dòng)物操作均符合動(dòng)物倫理學(xué)規(guī)范,對(duì)環(huán)境和生態(tài)影響等符合國家相關(guān)法律規(guī)定。
ACO小鼠表現(xiàn)出咳嗽,呼吸急促,喘息,分泌物增加,厭食,毛發(fā)褪色以及身體瘦小,這些癥狀都與臨床特征和病程相似。
HE染色檢測(cè)小鼠肺組織病理學(xué)變化,結(jié)果顯示,ACO組的組織病理學(xué)與COPD模型組相似,但是,浸潤由嗜酸性粒細(xì)胞組成并呈彌漫性病變。采用血細(xì)胞分類計(jì)數(shù)儀檢測(cè)肺泡灌洗液(BALF)中白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)的變化,與對(duì)照組相比,ACO組小鼠的BALF中總白細(xì)胞,淋巴細(xì)胞,單核細(xì)胞,嗜中性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞水平升高。Elisa法檢測(cè)BALF中炎性因子以及血清中IgE和IgG1水平的變化,ACO組的IL-4,IL-6,TNF-α,IFN-γ,IL-1β和IL-17A的水平較高,總IgE和IgG1水平顯著升高。
將Balb/C小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、asthma組、COPD組、ACO組。Asthma組于實(shí)驗(yàn)第0、7、14天腹腔注射OVA+100 μL氫氧化鋁凝膠致敏,第26-28天,連續(xù)三天氣管滴注OVA溶液進(jìn)行攻擊。COPD組于第15天和28天給予脂多糖(LPS)氣管滴注,第16-27和29-42天給與煙熏。ACO組和給藥組同時(shí)進(jìn)行asthma和COPD造模流程。對(duì)照組給予同等劑量的生理鹽水。未次熏煙24小時(shí)后,麻醉處死動(dòng)物并取材。
哮喘-慢性阻塞性肺疾病重疊(asthma-COPDoverlap,ACO),是一種同時(shí)具有哮喘和COPD特點(diǎn)的臨床綜合征,用以描述同時(shí)具有這兩種疾病特點(diǎn)的患者。2017年GINA報(bào)道,在多項(xiàng)流行病學(xué)研究中,由于定義和診斷方法的不同,納入對(duì)象的性別和年齡也有所不同,ACO的患病率介于15%~55%之間。ACO的患病率隨著年齡的增長而增加,在哮喘和COPD患者中,50歲以下的患病率<10%,而80歲以上患病率> 50%。
ACO的臨床表現(xiàn)與哮喘和COPD相似,主要癥狀為慢性咳嗽、喘息和活動(dòng)后氣促。除此之外,ACO患者比單純COPD患者更易患有其他合并癥,例如過敏性鼻炎、焦慮、胃食管返流疾病和骨質(zhì)疏松癥等,患心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)也更高。目前關(guān)于ACO的發(fā)病機(jī)制仍存在爭(zhēng)議,其潛在發(fā)病機(jī)制可能與兩種提出已久的假設(shè)有關(guān)。一種是"荷蘭假說",認(rèn)為哮喘和COPD是同一疾病過程的兩種不同疾病實(shí)體。
GINA雖未給出明確的ACO診斷標(biāo)準(zhǔn),但對(duì)于哮喘、COPD和ACO的鑒別和診斷提出了一個(gè)包含五個(gè)步驟的診斷方法。第一步:確定患者是否患有慢性氣道疾病;第二步:確定患者是否符合哮喘、COPD和ACO的初步臨床診斷;第三步:肺功能檢測(cè);第四步:開始初始治療;第五步:轉(zhuǎn)診進(jìn)行性檢查。同臨床表現(xiàn);另一種是"英國假說",認(rèn)為哮喘和COPD是發(fā)病機(jī)制不同的兩種不同疾病實(shí)體。
1、造模因素信息
OVA:Sigma
Al2(SO4)3﹒18H2O:上海美化化工股份有限公司。
NaOH:北京化工廠。
LPS:Sigma公司產(chǎn)品
大前門香煙:上海煙草集團(tuán)有限責(zé)任公司。
2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物背景信息
Balb/C小鼠,雄性,SPF級(jí),16-18g。
3、研究背景
目前ACO動(dòng)物模型尚未完全建立,治療藥物評(píng)估仍在起步階段。因此,本研究旨在建立符合疾病臨床特征的ACO小鼠模型,這項(xiàng)工作在未來將有助于對(duì)ACO的進(jìn)一步研究和臨床治療。
中文名稱:哮喘-慢性阻塞性肺疾病重疊癥小鼠模型
英文名稱:Asthma-COPD overlap mouse model
類型:哮喘-慢性阻塞性肺疾病重疊動(dòng)物模型
分級(jí):NA
用途:用于哮喘-慢性阻塞性肺疾病重疊(asthma-COPD overlap,ACO)研究。
研制單位:中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所_
保存單位:中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所




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